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【兆恒機械】什么是試劑空白和樣品空白?

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  • 添加日(ri)期:2021年04月(yue)24日(ri)

試劑空白

試劑空(kong)白(bai)是指由于測試試劑本身而帶來的測試結果的微小的正誤差。由于生化測試測量的吸光度為相對吸光度,所以從理論上說,所有終點法的測試都需要把試劑本身的吸光度扣除。試劑本身的吸光度就是試劑空(kong)白(bai)。測(ce)(ce)量(liang)方法是按照正常測(ce)(ce)試(shi)的試(shi)劑和(he)樣本(ben)(ben)量(liang),把(ba)樣本(ben)(ben)換成(cheng)蒸餾水來(lai)測(ce)(ce)量(liang)。

測試試劑的空白值對于一項測試尤為重要,當進行低濃度測定時應該從測試結果中扣除測試試劑的空白值。例如,如果從0.06mg/L的低濃度測試結果中減掉0.02mg/L的試劑空白值,就會使最終測定結果改變至少30%。而從1.23mg/L的高濃度測試結果中減掉0.02mg/L的試(shi)劑空(kong)白值,最終測定結果只發生了2%的變化。

測(ce)(ce)定(ding)試(shi)(shi)劑的(de)(de)(de)(de)空白(bai)值(zhi)(zhi)時(shi),需要使(shi)用高質(zhi)量的(de)(de)(de)(de)去離子水代替待測(ce)(ce)樣品,加入測(ce)(ce)試(shi)(shi)試(shi)(shi)劑,按照操作步(bu)驟(zou),進行常規(gui)測(ce)(ce)試(shi)(shi)。然后(hou),從(cong)樣品的(de)(de)(de)(de)測(ce)(ce)定(ding)結果中減去測(ce)(ce)試(shi)(shi)試(shi)(shi)劑的(de)(de)(de)(de)空白(bai)值(zhi)(zhi)。不(bu)同批次的(de)(de)(de)(de)測(ce)(ce)試(shi)(shi)試(shi)(shi)劑其空白(bai)值(zhi)(zhi)會有(you)所變化,所以,當使(shi)用不(bu)同批次的(de)(de)(de)(de)測(ce)(ce)試(shi)(shi)試(shi)(shi)劑時(shi),需要重新對它(ta)的(de)(de)(de)(de)空白(bai)值(zhi)(zhi)進行測(ce)(ce)定(ding)。

在傳統手工方法中,每次測定都要做至少三個管:測定管、標準管、空白管。其中空白管是試劑加蒸餾水,測出來也就是試劑空白。因為操作環境、儀器狀態、試劑穩定性等變異,所以要求每次都要測定試劑空(kong)白,稱為實時試劑空白(bai)

在全自動分析儀上,大體上是模擬手工操作。但許多全自動分析儀為追求速度,在設計上采用一些折中方法來測定試(shi)劑(ji)空(kong)白。有些全自動分析儀是做不了實時試劑(ji)空白,因為它們全是先加入樣本后加試劑。為了折中,只好在定標時做一個試劑空白保存起來,需要扣除試劑空白時再減這(zhe)個預先保(bao)存的(de)值。這(zhe)種做法(fa),對于(yu)比較(jiao)穩(wen)定的(de)試劑來講,對結(jie)果影(ying)響不大。

總的說來,自動生化儀上的試(shi)劑空白(bai)一般表現為零(ling)點吸光度(du)(du),該吸光度(du)(du)是通過校準確立的。

樣本空白:

樣(yang)(yang)品空(kong)(kong)白是指在某項測(ce)(ce)試(shi)(shi)程(cheng)序(xu)中,使用某個樣(yang)(yang)品的(de)(de)濃度作為儀(yi)(yi)器的(de)(de)零基(ji)準(zhun)。樣(yang)(yang)品空(kong)(kong)白可以抵消加入測(ce)(ce)試(shi)(shi)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)前由于樣(yang)(yang)品自(zi)身(shen)存在的(de)(de)色度或濁(zhuo)度而(er)引起的(de)(de)正誤差。由于溶血、脂血、黃疸等情況(kuang),會導致樣(yang)(yang)本(ben)本(ben)身(shen)的(de)(de)吸(xi)光度對測(ce)(ce)試(shi)(shi)結果(guo)造成(cheng)影響。所以對樣(yang)(yang)本(ben)本(ben)身(shen)吸(xi)光度的(de)(de)測(ce)(ce)量(liang),即樣(yang)(yang)本(ben)空(kong)(kong)白,可以去(qu)除(chu)這方面的(de)(de)影響。測(ce)(ce)量(liang)方法是按照正常(chang)測(ce)(ce)試(shi)(shi)的(de)(de)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)和樣(yang)(yang)本(ben)量(liang),把(ba)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)換(huan)成(cheng)蒸餾水或生理鹽水來(lai)進行測(ce)(ce)量(liang)。自(zi)動生化儀(yi)(yi)上,很難界定樣(yang)(yang)本(ben)空(kong)(kong)白。與(yu)消除(chu)樣(yang)(yang)本(ben)空(kong)(kong)白有(you)關(guan)的(de)(de)大約有(you)如下(xia)幾點:

a).在雙試劑測定時,加(jia)入試劑1和(he)樣(yang)品后的吸光度可(ke)一定程度上扣(kou)(kou)除樣(yang)本空白(bai),所(suo)以有單試劑不能扣(kou)(kou)除樣(yang)本空白(bai)的說法(fa)。

b).現在(zai)優(you)質的試劑的抗干擾能(neng)力都比較強,比如有些雙試劑,R1加入(ru)后先(xian)和樣(yang)本孵育一(yi)段(duan)時間,將血紅蛋白、脂肪、膽(dan)紅素等反(fan)應掉,再(zai)加入(ru)R2開始(shi)測定反(fan)應。在(zai)一(yi)定范(fan)圍內都可以(yi)消除(chu)樣(yang)本空白。

c).現代全自動生化(hua)儀(yi)大多采用雙(shuang)波(bo)長(chang)測(ce)定。雙(shuang)波(bo)長(chang)測(ce)定的(de)(de)原(yuan)則是根據(ju)干擾組分和待(dai)測(ce)物質吸(xi)收(shou)光(guang)譜的(de)(de)峰形特征(zheng),選擇兩(liang)(liang)(liang)個波(bo)長(chang)和。使(shi)干擾組分在這兩(liang)(liang)(liang)個波(bo)長(chang)處(chu)的(de)(de)吸(xi)光(guang)系(xi)(xi)數相等,而(er)使(shi)待(dai)測(ce)物質在兩(liang)(liang)(liang)波(bo)長(chang)處(chu)的(de)(de)吸(xi)光(guang)系(xi)(xi)數有顯著差(cha)別。以兩(liang)(liang)(liang)波(bo)長(chang)分別測(ce)定分析溶液的(de)(de)吸(xi)光(guang)度(du),以兩(liang)(liang)(liang)個吸(xi)光(guang)度(du)值之差(cha)(△A)計算(suan)。這也可以扣(kou)除一(yi)部分樣本空白。

d).有些(xie)儀器有專門的(de)“血清信息”功能的(de)設置。做法都是單(dan)獨占用一個空白通道來計算,這也(ye)叫做樣品空白校(xiao)準(zhun)。

在使(shi)用樣品(pin)空白對(dui)測試儀器(qi)進行調(diao)(diao)零(ling)后,只有樣品(pin)與測試試劑發生(sheng)反應(ying)而產生(sheng)的色度被測定了。由于樣品(pin)的背景色度和(he)濁度往往各不相同,樣品(pin)空白經(jing)常用來對(dui)儀器(qi)進行調(diao)(diao)零(ling)。

試劑空白和(he)樣品(pin)空白(bai)的空白(bai)概念區別要(yao)點:**空白(bai)=只含**的空白(bai)(吸光度(du))

3、水空白:

    比(bi)色杯在加入水(shui)以后的(de)吸光度。水(shui)空(kong)白(bai)的(de)意(yi)義主要(yao)是對光路(lu)系(xi)統(tong)進行檢查和(he)校正(zheng),如光源,比(bi)色杯等,同時在計算中起到(dao)消(xiao)除“杯差”的(de) 作(zuo)用。日(ri)立7060中的(de)Cell Blank(杯空(kong)白(bai))測定的(de)就是水(shui)空(kong)白(bai)。